Publique un comentario 
Descargar
PCR para la detección de la mutación p.W402X y su identificación en familias cubanas con síndrome de Hurler
Resumen
Introducción: La mucopolisacridosis tipo I es una enfermedad genética de almacenamiento lisosomal con un modo de herencia autosómico recesivo. El síndrome de Hurler es la forma más severa de presentación. La causa molecular es la deficiencia en la actividad de la enzima αL-iduronidasa producto de mutaciones en el gen IDUA. La que con mayor frecuencia se ha identificado en Europa y América es la c.1205G>A; p.W402X. En Cuba, hasta este momento, no hay disponibles estudios moleculares.
Objetivos: Introducir una técnica de PCR con digestión enzimática para la detección de la mutación p.W402X y caracterizar molecularmente a familias con síndrome de Hurler identificadas entre el 2008 y el 2018.
Métodos: Se empleó ADN obtenido a partir de sangre seca impregnada en papel de filto. Se estandarizó un PCR con digestión enzimática producto de modificaciones realizadas al método descrito por Scott y otros en 1992. Se estudiaron cinco familias con algún miembro afectado con fenotipo Hurler.
Resultados: En todas las familias estudiadas se identificó la mutación p.W402X; en tanto los pacientes mostraron una actividad enzimática de αL-iduronidase leucocitaria muy disminuida.
Conclusiones: Dentro del espectro mutacional del gen IDUA responsable del síndrome de Hurler en Cuba en el periodo evaluado, la mutación p.W402X es la más frecuente. Por lo tanto, la técnica de biología molecular introducida debe ser muy efectiva para el diagnóstico molecular de esta entidad en el país.
Palabras clave
Referencias
Neufeld EF, Muenzer J. The mucopolysaccharidoses. En: Scriver C, Beaudet A, Sly W. The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease. *Ed. New York: McGraw Hill; 2007.pp 3421–3452.
Baldellou A, Sanjurjo P, del Toro M. Enfermedades Lisosomales. En: Sanjurjo P y Baldellou A. Diagnóstico y tratamiento de las enfermedades metabólicas hereditarias. 4ª Edición. Madrid: Editorial Ergón; 2014. pp 861-895
Dalmau J, Vitoria I, del Toro M. Mucopolisacaridosis tipo I. En Colectivo de autores. Guía para el manejo de las MPS. Madrid: Editorial Ergon;2015.pp 7-19
Online Mendelian Inheritance in Man, OMIM®. McKusick-Nathans Institute of Genetic Medicine, Johns Hopkins Univer¬sity (Baltimore, MD), [2018]. Disponible en: www: http://omim.org/.
Hurler Gertrud. Übereinen Typmultipler Abartungen, vorwieg end am Skelettsystem. Z Kinderheilk. 1919;24:220-234
Bach G, Friedman R, Weissmann B and Neufeld EF. The defect in Hurler and Scheie Syndromes: Deficiency of alpha-L-iduronidase. Proc Natl Acad Sci USA [online]. 1972 [citado 16 junio 2017];69(8):2048-2051. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC426865/
Scott HS, Guo XH, Hopwood JJ, and Morris CP. Structure and sequence of the human α-L-Iduronidase gene. Genomics [online]. 1992 [citado 16 junio 2017];13(4):1311–1313. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMID1505961/
Bunge S, Kleijer WJ, Steglich C, Beck M, Zuther C, Morrris CP et al. Mucopolysaccharidosis type I: Identification of 8 novel mutations and determination of the frequency of the two common alpha-L-iduronidase mutations (W402X and Q70X) among European patients. Hum. Mol. Genet. 1994[citado 21 septiembre 2017];3(6):861-866. Disponible en: https://academic.oup.com/hmg/article-abstract/3/6/861/594316
Gort L, Chabas A, Coll MJ. Analyses of five mutations in 20 Mucopolysaccharidoses type I patients: high prevalence of the W402X mutation. Hum. Mutat. [online]. 1998 [citado 27 septiembre 2017];11(4):332-333. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10215409
Beesley CE, Meaney CA, Greenland G, Adams V, ellodi A, Young EP et al. Mutational analyses of 85 mucopolysaccharidoses type I families: frequency of known mutations, identification of 17 novel mutations and in vitro expression of missense mutations. Hum. Genet. 2001[citado 18 octubre 2017];109(5):03-511. Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs004390100606
Pineda T, Marie S, Gonzalez J, García AL, Acosta A, Morales M et al. Genotypic and bioinformatic evaluation of the alpha L iduronidase gene and protein in patients with mucopolysaccharidoses type I from Colombia, Ecuador y Perú. Molecular Genetics and Metabolic Reports. 2014[citado 18 octubre 2017];1:468-473. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5121354/
Scott HS, Litjens T, Hopwood JJ, Morris CP. A common mutation for mucopolysaccharidosis type I associated with a severe Hurler syndrome phenotype. Hum Mutat. 1992 [citado 20 noviembre 2017];1:103-108. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1301196
Clarke LA, Nelson PV, Warrington CL, Morris CP, Hopwood JJ and Scott HS. Mutation analysis of 19 North American mucopolysaccharidosis type I patients: Identification of two additional frequent mutations. Hum Mutat. 1994[citado 22 febrero 2018];3:275-282. Disponible en: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/humu.1380030316
Declaración de Helsinki-AMM. Principios éticos para las investigaciones médicas en seres humanos. 64a Asamblea General. Asociación Médica Mundial. Octubre 2013. Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/recursos/helsinki.pdf
Saiki RK, Scharf S, Faloona F, Mullis KB, Horn GT, Erlich HA, Arnheim N. Enzymatic amplification of beta-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia. Science. 1985 [citado 22 marzo 2017];230(4732):1350-4. Disponible en: https://science.sciencemag.org/content/230/4732/1350.long
Haig H. Kazazian Jr. Use of PCR in the Diagnosis of Monogenic Disease. In PCR Technology. Principles and Applications for DNA Amplification. Ed Henry A. Erlich Springer Nature. 2018; p153-169
Randall K. Saiki. The desing and optimization of the PCR IN PCR technology. Principles and Applications for DNA Amplification. Ed Henry A. Erlich Springer Nature. 2018; p153-169
Taq PCR Handbook. Third Edition 2010. Disponible en www.qiagen.com
Terlato NJ, Cox GF. Can mucopolysaccharidoses type I disease severity be predicted based on a patient's genotype? A comprehensive review of the literature. Genet Med. 2003[citado 6 abril 2018];5(4):286-294. Disponible en: https://insights.ovid.com/article/00125817-200307000-00004
Kingma SD, Langereis EJ, de Klerk CM, Zoetekouw I, Wagemans T, Ijist I, et al. An algorithm to predict phenotypic severity in mucopolysaccharidoses type I in the first month of life. Orphanet Journal of Rare Diseases. [online]. 2013 [citado 6 abril 2018];8:99-110. Disponible en: http://www.ojrd.com/content/8/1/99
Menéndez Sainz MA. Diagnóstico enzimático de las enfermedades de almacenamiento lisosomal. Experiencia de 20 años. Tesis en opción al título de Doctor en Ciencias. Cuba: Universidad de Ciencias Médicas de La Habana;2011
Enlaces refback
- No hay ningún enlace refback.
Esta obra está bajo una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial 4.0 Internacional.
